液相色譜柱的裝柱方法

瀏覽： 5776| 更新時(shí)間：2016-08-04 |

　　液相色譜柱的一些要求

　　zui常用的色譜柱填充劑為化學(xué)鍵合硅膠。反相色譜系統(tǒng)使用非極性填充劑，以十八烷基硅烷鍵合硅膠zui為常用，辛基硅烷鍵合硅膠和其他類型的硅烷鍵合硅膠（如氰基鍵合硅烷和氨基鍵合硅烷等）也有使用。正相色譜系統(tǒng)使用極性填充劑，常用的填充劑有硅膠等。離子交換色譜系統(tǒng)使用離子交換填充劑；分子排阻色譜系統(tǒng)使用凝膠或高分子多孔微球等填充劑；對映異構(gòu)體的分離通常使用手性填充劑。

　　填充劑的性能（如載體的形狀、粒徑、孔徑、表面積、鍵合基團(tuán)的表面覆蓋度、含碳量和鍵合類型等）以及色譜柱的填充，直接影響供試品的保留行為和分離效果?？讖皆?5nm（1nm=10Å）以下的填料適合于分析分子量小于2000 的化合物，分子量大于2000 的化合物則應(yīng)選擇孔徑在30nm 以上的填料。除另有規(guī)定外，分析柱的填充劑粒徑一般在3μm~10μm 之間。粒徑更?。s2μm）的填充劑常用于填裝微徑柱（內(nèi)徑約2mm），使用微徑柱時(shí)，輸液泵的性能、進(jìn)樣體積、檢測池體積和系統(tǒng)的死體積等必須與之匹配；如有必要，色譜條件也需作適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。當(dāng)對其測定結(jié)果產(chǎn)生爭議時(shí)，應(yīng)以品種正文規(guī)定的色譜條件的測定結(jié)果為準(zhǔn)。存放前除去雜質(zhì)和鹽，采用合適的存放溶劑，避免色譜柱床的干枯，避免機(jī)械振動(dòng)，防止細(xì)菌生長，注意存放的溫度。

　　液相色譜柱的裝柱方法

　　1. 色譜柱應(yīng)該是可以直接接在勻漿罐上的，如果不能，則需要一個(gè)轉(zhuǎn)換接頭。這個(gè)轉(zhuǎn)換接頭的尺寸很重要，既要能防止漏液，又要避免過硬或尺寸不合適而導(dǎo)致色譜柱接口螺紋的損壞；

　　2. 具體裝柱過程一般來說是①先以合適的勻漿液（多為有機(jī)溶劑，劉國詮老師的《色譜柱技術(shù)》一書中列的比較全，可供參考）將填料充分分散（可以借助攪拌、超聲等方式）；②在填料勻漿的過程中，完成準(zhǔn)備工作，即把色譜柱接在勻漿罐的下端（色譜柱不接勻漿罐的一段要接好篩板和柱頭，確保擰緊但不能擰死以免損壞色譜柱），打開勻漿罐上端和氣泵之間的接頭以便灌入勻漿液；③勻漿液罐好后，接好勻漿罐上端接頭，開始加壓；④選擇合適的壓力，就可以把填料壓實(shí)了；⑤穩(wěn)定在適當(dāng)?shù)膲毫ι蠅阂欢〞r(shí)間后，卸掉壓力，卸下色譜柱，把接勻漿罐這一段的填料抹平，裝上篩板和柱頭即可使用。

　　3. 裝柱是個(gè)困難的過程，需要耐心摸索壓力、勻漿液體積等參數(shù)，才能確保柱床均勻密實(shí)，達(dá)到*柱效和峰形。如果裝的不好，則可能出現(xiàn)柱效不夠，或拖尾等問題。
液相色譜柱的裝柱方法一般情況下都是這樣操作的，特殊情況請廠家或者代理商。

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